​微生物过滤系统Millipore(微生物过滤系统检定规程)

微生物过滤系统Millipore(微生物过滤系统检定规程)

过滤系统millipore的设计和实施。本书介绍了millipore的基本概念、工作原理、过滤 *** 、常见问题解答以及millipore的应用案例。

一：微生物过滤系统Millipore

问：最近要做一些培养基，有一些糖类需要过滤除菌，但不知道怎么操作，还需要什么辅助设备？

你只要有滤膜和配套的过滤器就可以了，一般在超净工作台上进行。滤膜用0.22微米或0.45微米两种规格，指的是滤膜的孔径大小吧。一般0.22就够了！

如果溶液的量比较大，超过500ml，可以采用已灭菌的抽滤瓶，预先垫好0.22um 的滤膜。抽滤瓶灭菌前要检查封口用纱布或棉花堵牢，使用时，不用在无菌室中进行，只要保证收集瓶无菌状态就可以。抽滤后，过滤好的溶液在无菌条件下倒进已灭菌的空试剂瓶中。

如果用小量的溶液过滤，无菌室内用一次性器和一次性0.22um滤膜（millipore或pall都有卖）就可以。

看过滤的量，如果量小，用器加滤器、0.22微米滤膜过滤，滤器加上滤膜后盖紧，稍旋松，饭盒密封100度蒸馏水煮沸30分钟灭菌，用来承接无菌糖水的瓶需高压。用时在无菌操作台上操作，并先旋紧滤器，注意滤器外流下去的哪怕一滴也会造成染菌；过滤应该是费力的，如果感觉很轻松，则滤膜已破。0.45微米的滤膜一般用于两次过滤的第一次，以防止0.22堵塞。器，若能高压更好些。

如果量大，正压可用蠕动泵接皮管接不锈钢滤器大张滤膜，这些都是要高压的。负压可用抽滤。

二：微生物过滤系统安装

1、配制溶液

配制固体培养基时，先将上述已配好的液体培养基煮沸，再将称好的琼脂加入，继续加热至完全融化。并不断搅拌，以免琼脂糊底烧焦。

2、调节pH值 

用pH试纸（或pH电位计、氢离子浓度比色计）测试培养基的pH值，如不符合需要，可用10%HCl或10%NaOH进行调节，直到调节到配方要求的pH值为止。

3、过滤

用滤纸、纱布或棉花趁热将已配好的培养基过滤。用纱布过滤时，最好折叠成六层，用滤纸过滤时，可将滤纸折叠成瓦棱形，铺在漏斗上过滤。

4、分装

已过滤的培养基应进行分装。如果要 *** 斜面培养基，须将培养基分装于试管中。

三：微生物过滤系统容易长菌

膜过滤是一种精密分离技术，可以实现分子级过滤，它是利用膜孔隙的选择透过性进行两相分离的技术。更多merck millipore相关内容请到默克生命科学官网查看：www.sigmaaldrich.cn

中国药典中提到“滤器及滤膜使用前应采用适宜的 *** 灭菌 。使用时，应保证滤膜在过滤前后的完整性。”

但实际在高温高压灭菌的同时，会对滤膜有一定损害，用户也不方便进行滤膜完整性测试，还是建议用户使用由厂家COA进行质量保证的无菌滤膜

滤膜制成后不建议蒸汽灭菌，可选择环氧乙烷或伽马射线灭菌。

对大多数微生物而言，0.45µm和0.7µm的混合纤维素膜有更好的恢复生长。

默克密理博对滤膜质量控制非常严格

如孔径测试，流速，析出物，截留率，恢复生产滤，无菌性